シングルgRNA 標準プラスミドCRISPRベクター
U6 Promoter: ヒトU6 snRNAのプロモーター。small RNAの転写をするRNAポリメラーゼIIIによってgRNAを高レベルで発現する。
gRNA: Streptococcus pyogenes由来のCas9用のgRNA。
Terminator: gRNAの転写を停止する。
CBh promoter: チキン β‐アクチンプロモーター。下流のCas9ヌクレアーゼを発現する。
Cas protein: Cas9ヌクレアーゼ(実験に応じてCas9もしくはhCas9-D10Aを選択)。
BGH pA: ウシ成長因子ポリアデニレーションシグナル。上流ORFの転写を停止する。
CMV promoter: ヒトサイトメガロウイルス(CMV)プロモーター。下流のマーカー遺伝子を遍在的に発現する。
SV40 late pA: SV40(Simian virus 40)のlateポリアデニレーションシグナル。上流マーカー遺伝子の転写を停止する。
Ampicillin: アンピシリン耐性遺伝子。 E.coliへのアンピシリン耐性によるプラスミドの維持を可能にする。
pUC ori: pUC複製起点。E.coliでプラスミドを高コピーで維持する。
デュアルgRNA 標準プラスミドCRISPRベクター
U6 Promoter: ヒトU6 snRNAのプロモーター。small RNAの転写をするRNAポリメラーゼIIIによってgRNAを高レベルで発現する。
gRNA #1: Streptococcus pyogenes由来のCas9用のgRNA#1。
gRNA #2: Streptococcus pyogenes由来のCas9用のgRNA#2。
Terminator: gRNAの転写を停止する。
CBh promoter: チキン β‐アクチンプロモーター。下流のCas9ヌクレアーゼを発現する。
Cas protein: Cas9ヌクレアーゼ(実験に応じてCas9もしくはhCas9-D10Aを選択)。
BGH pA: ウシ成長因子ポリアデニレーションシグナル。上流ORFの転写を停止する。
CMV promoter: ヒトサイトメガロウイルス(CMV)プロモーター。下流のマーカー遺伝子を遍在的に発現する。
SV40 late pA: SV40(Simian virus 40)のlateポリアデニレーションシグナル。上流マーカー遺伝子の転写を停止する。
Ampicillin: アンピシリン耐性遺伝子。E.coliへのアンピシリン耐性によるプラスミドの維持を可能にする。
pUC ori: pUC複製起点。E.coliでプラスミドを高コピーで維持する。