組み換えタンパク質発現
ベクタービルダーは、タンパク質構造解析、酵素アッセイ開発、創薬、診断、バイオエンジニアリングなどの様々な用途に適した複数のタンパク質発現プラットフォームを採用し、カスタマイズされた組換えタンパク質生産サービスを提供しています。当社のタンパク質生産プロセスは、当社のカスタム組換えタンパク質発現ベクターを利用し、高度に最適化されているために高品質の組換えタンパク質生産を可能にします。さらに、お客様からご提供いただいたベクターから組換えタンパク質を生産することにも対応しています。
特長
- ワンストップソリューション： ベクターデザインから生産スケールのタンパク質精製までのすべてをサポート
- 包括的なプラットフォーム： 様々な発現系を柔軟に選択可能
- カスタマイズ性： 直感的に操作できるベクターデザインプラットフォームで、様々な精製タグや検出タグを自由に追加可能
- 高品質： 幅広い精製方法とQCサービスを利用した高い品質
組み換えタンパク質発現システム
タンパク質生産ワークフロー
ご注文方法
FAQ
すべての組換えタンパク質発現システムには長所と短所があります。それらを考慮してプロジェクトに最適なシステムを選択してください。以下の表に各システムの長所と短所をまとめました。
| 組み換えタンパク質発現システム | 長所 | 短所 |
|---|---|---|
| 大腸菌 |
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| 哺乳類細胞 |
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| 昆虫細胞 |
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| 無細胞系 |
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タグは組換えタンパク質生産に頻繁に利用されます。タグによって精製工程を合理化でき、ある種のタグはタンパク質の溶解度、収量、純度の向上に寄与します。タグがプロテアーゼ切断部位のとなりに配置されていれば、精製後に除去することができます。切断効率は標的タンパク質によって異なります。タンパク質発現と精製にとって、適切なタグを注意深く選択することは極めて重要です。以下の表に、一般的に使用されるタグの概要、その利点と限界をまとめました。
| タグ | よく使用されるシステム | 利点 | 限界 |
|---|---|---|---|
| GST | 大腸菌、昆虫細胞 |
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| His | すべて |
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| SUMO | 大腸菌、昆虫細胞 |
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| Flag | 哺乳類細胞、昆虫細胞 |
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| MBP | 大腸菌、昆虫細胞 |
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| Fc | 哺乳類細胞、昆虫細胞 |
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タグに関する詳細は、タンパク質タグをご参照ください。
ベクタービルダーによってクローニングされたベクターはすべて100%の配列保証がなされます。ベクタービルダーの組換えタンパク質は、厳格な品質管理を受けて生産されます。ほとんどの発現システムの標準QCには、1) 制限酵素切断解析とサンガーシークエンスによるタンパク質発現ベクターの検証、2) A260/280測定とSDS-PAGEによるタンパク質濃度と純度の決定が含まれます。以下の表に示されている一般的な追加QCサービスは、ご要望に応じて提供可能です。
| 追加QCサービス | 方法 |
|---|---|
| エンドトキシン試験 | LAL |
| タンパク質の特性評価 | ウェスタンブロット |
| インタクト質量分析 (還元条件) | |
| SEC-HPLC | |
| SEC-MALs | |
| タンパク質N末端シーケンシング | |
| 宿主細胞タンパク質試験 | |
| タグ除去 | プロテアーゼ分解 |
| カイネティクスとアフィニティー分析 | Octet |
| Biacore | |
| げっ歯類用病原体検査パネル | |
その他のQCサービスについてはお問い合わせ下さい
ベクタービルダーは、サイズ排除クロマトグラフィー（ゲルろ過）、アフィニティー精製、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィーなど、幅広いタンパク質精製法を提供しています。HisタグやGSTタグをもつ組換えタンパク質の場合は、アフィニティークロマトグラフィーが採用され、タグをもたない組換えタンパク質の場合は、サイズ排除クロマトグラフィー（ゲルろ過）が採用されます。タンパク質発現ベクターのデザインとタンパク質の特性に基づいて精製法が選択されます。