プロセス開発

ベクターの最適化

ベクタークローニングおよびウイルスパッケージングサービスの世界有数のプロバイダーである弊社は、ベクター学およびウイルス学における広範な知識を蓄積しています。そのため、様々な基礎研究および遺伝子治療アプリケーションに最適なベクターデザインをご提供することができます。VectorBuilderは、効果的で、実験目的に的を絞った、安全で手ごろな価格の無数のベクターデザインを顧客に提供しています。毎年、50,000を超えるカスタムベクターを設計及びクローニングし、24,000 を超えるカスタムウイルスを in vitro, ex vivo そしてin vivo で使用するためにパッケージしています。 さらにBACとYAC リコンビニアリングに関する弊社の強力な専門知識を使って、巨大なウイルスゲノムを簡単に操作し、新しいウイルスベクターを開発することができます。また、複雑性の高いライブラリー構築技術とNGSを利用した大規模なスクリーニングプラットフォームを既に確立しています。そのため、最適なベクターデザインのスクリーニングが迅速に行えます。当社のベクター最適化能力は以下を含みます:

• 完全に検証されたベクターコンポーネントの豊富なコレクション

  バックボーン、プロモーター（恒常的、組織特異的、誘導型、シンセティック型）、数々のORF、リンカー、豊富なタグ、 shRNA と CRISPRターゲットサイトのライブラリー、その他。

• 大規模スクリーニングプラットフォーム

  組織特異的プロモーター/エンハンサースクリーニング、キャプシッド進化、shRNAスクリーニング、CRISPRスクリーニング、 Rep/Cap プロモーター最適化、 CAR抗体スクリーニング、その他。 

• ウイルスゲノムエンジニアリング

  新規ウイルスベクターのDe novo 構築、 その中には、巨大なウイルスゲノムから BACやYACリコンビニアリング技術を使用したベクター構築も含む。実績コロナウイルスベクターと単純ヘルペスウイルスベクター（HSV)の構築。

アップストリームのプロセス開発(USP)

当社のプラスミドDNAとウイルスベクターの USP機能は以下の通りです：

• 細胞株の開発

  大腸菌、哺乳類細胞株、昆虫細胞株

• 大腸菌発酵のスケールアップとスケールアウト 

  発酵システムはフラスコサイズから100リットルの撹拌発酵槽  

• 哺乳類と昆虫細胞培養のスケールアップとスケールアウト 

  • 接着性細胞システム: フラスコ、セルファクトリー、ウエーブバイオリアクター（最大50 L）、固定床バイオリアクター(iCELLis Nano & 500, Univercells Technologies scale-X & NevoLine Upstream)
  • 浮遊性細胞システム: フラスコ、シングルユーズのバイオリアクター(最大200 L)

• 培地のスクリーニングと最適化

  抗生物質フリー、無血清培地、動物由来成分除去培地、TSE/BSEフリー培地、化学成分同定培地

• 高密度細胞培養の最適化

  大腸菌、哺乳類細胞、昆虫細胞

• トランスフェクション/インフェクションの最適化

  Rep/Cap とヘルパープラスミドの最適化、プラスミドDNAの混合比率の最適化、トランスフェクション試薬の最適化、感染 MOIの最適化、細胞密度の最適化、その他。 

ダウンストリームプロセス開発 (DSP)

当社のプラスミドDNAとウイルスベクターの DSP機能は以下の通りです:

• ハーベストと細胞溶解の最適化

  ハーベスト所要時間の最適化、細胞溶解法の最適化、ヌクレアーゼ処理の最適化、その他。

• 精製の最適化

  • クロマトグラフィー: サイズ分離、イオン交換、アフィニティー、混合法
  • 濃度勾配遠心法: ショ糖、塩化セシウム、イオジキサノール

• クラリフィケーション、濃縮、バッファー交換

  UF/DF (接線流、中空ファイバー、デプスフィルター)

関連技術情報

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