GMPウイルスベクター製造
VectorBuilderは、細胞・遺伝子治療開発のための様々な種類のウイルスベクター製造において、幅広い専門知識を有しています。当社は、遺伝子治療薬開発のパイプライン全体にわたるあらゆるニーズを満たすため、様々なスケールと品質属性でこれらを提供します。当社のチームは、アデノ随伴ウイルス（AAV）およびレンチウイルスの大規模GMP製造のためのプラットフォーム技術を確立・検証しており、さらにアデノウイルス、MMLV、ヘルペスウイルス（HSV）、水疱性口内炎ウイルス（VSV）などのその他の種類のウイルスベクターを製造するための専門知識と能力も有しています。
特長
ウイルスパッケージングの専門性 あらゆるスケールで最高の力価と効力を達成するために最適化された独自の技術。
スケールに合わせたソリューション 研究用途から商用利用まで、製造ニーズを支える汎用性の高いプラットフォーム。
最高の品質と一貫性 最新鋭のGMP施設と設備により、最高の純度と一貫性を提供します。ご提供しているウイルスベクターのグレード
当社は、創薬研究、前臨床研究、治験、および商業化を含む様々な目的に合わせ、複数のグレードでウイルスを製造しています。
研究開発 
非臨床試験 
臨床試験 
商用 - 遺伝子機能・制御の研究などの基礎研究、創薬研究に適しています。
- 厳格な品質管理のもと、標準的な細胞培養施設で製造されます。
- 前臨床研究（例：動物を使用した安全性や薬物動態試験）に適しています。
- PASまたはGMP施設で、GMPガイドラインの主要な特徴を取り入れた方法で製造されます。
- 抗生物質フリーおよび動物由来成分フリーの条件下でも製造可能です。
- 前臨床研究、治験、および商用に適しています。
- GMPガイドラインに厳格に準拠した認定GMPスイートで製造されます。
- 包括的なQC試験を実施し、バッチリリース報告書を発行します。
ウイルスグレードの比較
| リサーチグレード | GMP-like | GMPグレード | |
|---|---|---|---|
| 用途 | 礎研究、創薬研究、および前臨床研究 | 薬物の安全性および代謝の動物試験などの前臨床研究 | 前臨床研究、治験、および商業化 |
| 製造スケール | 1バッチあたり5x1010から1014GC | 1バッチあたり5x1013から1017GC | 1バッチあたり1014から1017GC |
| 作業日数 | 10～50日 | 4～5ヶ月 | 6～12ヶ月 |
| 製造施設 | 標準的なBSL-2実験室での並行製造 | 区画化されたBSL-2製造スイートで製造 | 認証されたGMPスイート（BSL-2）で製造 |
| 品質管理システム | ISO9001 | GMP製造の主要な特徴を取り入れたISO9001 | GMP製造のためのICH品質ガイドライン |
| 文書管理とトレーサビリティ | なし | なし | 全ての工程においてあり |
| ベクターの特性評価 | 制限酵素消化、インサート配列決定 | 制限酵素消化、全長配列決定 | 制限酵素消化、全長配列決定 |
| プロセス開発 | なし | 個々のプロジェクトニーズに基づき、ケースバイケースで実施 | あり |
| セルバンク樹立 | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 抗生物質フリー | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 動物由来成分フリー | なし | 浮遊培養に限り要望に応じて対応可 | 浮遊培養に限り実施可 |
| 精製 | 超遠心分離 | 超遠心分離、アフィニティー精製、IEX精製、混合クロマトグラフィー | 超遠心分離、アフィニティー精製、IEX精製、混合クロマトグラフィー |
| QCおよび出荷時検査 | 力価測定、SDS-PAGE、エンドトキシン検出、無菌試験、マイコプラズマ検出など | 個々のプロジェクトニーズに基づき、ケースバイケースで実施 | フルパネルQC試験、個々のプロジェクトニーズに応じた分析法開発 |
| 無菌充填/仕上げ | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 保存用サンプルの保管 | 要望に応じて対応可 | 要望に応じて対応可 | あり |
| 交付書類 | COA | 1. COA 2. 製造サマリー 3. TSE/BSE文書 (要望に応じて対応可) |
1. COA 2. TSE/BSE文書 3. CTD文書 4. その他(BMRなど要望に応じて対応可) |
| リサーチグレード | GMP-like | GMPグレード | |
|---|---|---|---|
| 用途 | 基礎研究、創薬研究、および前臨床研究 | 薬物の安全性および代謝の動物試験などの前臨床研究 | 前臨床研究、治験、および商業化 |
| 製造スケール | >2.5x107 TU | 1バッチあたり109から1012 TU | 1バッチあたり5x109 から 1012 TU |
| 作業日数 | 8-16 日 | 4-5 ヶ月 | 6-12 ヶ月 |
| 製造施設 | 標準的なBSL-2実験室での並行製造 | 区画化されたBSL-2製造スイートで製造 | 認証されたGMPスイート（BSL-2）で製造 |
| 品質管理システム | ISO9001 | GMP製造の主要な特徴を取り入れたISO9001 | GMP製造のためのICH品質ガイドライン |
| 文書管理とトレーサビリティ | なし | なし | 全ての工程においてあり |
| ベクターの特性評価 | 制限酵素消化、インサート配列決定 | 制限酵素消化、全長配列決定 | 制限酵素消化、全長配列決定 |
| プロセス開発 | なし | 個々のプロジェクトニーズに基づき、ケースバイケースで実施 | あり |
| セルバンク樹立 | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 抗生物質フリー | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 動物由来成分フリー | なし | 浮遊培養に限り要望に応じて対応可 | 浮遊培養に限り実施可 |
| 精製 | 超遠心分離 | 超遠心分離、アフィニティー精製、IEX精製、混合クロマトグラフィー | 超遠心分離、アフィニティー精製、IEX精製、混合クロマトグラフィー |
| QCおよび出荷時検査 | 力価測定、SDS-PAGE、エンドトキシン検出、無菌試験、マイコプラズマ検出など | 個々のプロジェクトニーズに基づき、ケースバイケースで実施 | フルパネルQC試験、個々のプロジェクトニーズに応じた分析法開発 |
| 無菌充填/仕上げ | なし | 要望に応じて対応可 | あり |
| 保存用サンプルの保管 | 要望に応じて対応可 | 要望に応じて対応可 | あり |
| 交付書類 | COA | 1. COA 2. 製造サマリー 3. TSE/BSE文書 (要望に応じて対応可) |
1. COA 2. TSE/BSE文書 3. CTD文書 4. その他(BMRなど要望に応じて対応可) |
ウイルスベクターのGMP製造ワークフロー
VectorBuilderは、最高品質の製品を納期通りにお届けすることに努めています。以下に、GMPウイルスベクターの典型的な製造ワークフローを示します。
樹立
- 制限酵素処理
- シーケンシング
- 細胞株開発
- USP/DSP
- 分析法開発
- RCB
（リサーチセルバンク） - MCB
（マスターセルバンク） - WCB
（ワーキングセルバンク）
- 区画化されたスイート
（GMP-like） - GMPスイート
（GMPグレード）
- 閉鎖系システム
- 充填/仕上げ
- 一般/物理的特性
- 同一性（特性）
- 純度
- 安全性
プラットフォーム技術
AAVは、接着条件（多層フラスコまたは固定床型バイオリアクター）または無血清浮遊条件（最大200 Lのシングルユースバイオリアクター）下のHEK293細胞でパッケージングされます。ご要望に応じて、浮遊Sf9昆虫細胞でのAAVパッケージングも可能です。当社では、1バッチあたり最大10¹⁷ GCのAAVの生産スケールが可能です。
(多層フラスコ、
固定床型バイオリアクター)
(シングルユース
バイオリアクター)
フェクション
(PEI、
リン酸カルシウム)
(TFF)
(クロマト
グラフィー)
(TFF、ろ過滅菌、
充填/仕上げ)
レンチウイルスパッケージング（VSV-Gまたはその他のウイルス表面タンパク質でシュードタイプ化された第2世代または第3世代）は、接着条件（多層フラスコまたは固定床型バイオリアクター）または無血清浮遊条件（最大200 Lのシングルユースバイオリアクター）下のHEK293細胞を用いて実施されます。当社では、1バッチあたり最大1012 TUの生産スケールに対応できます。
(多層フラスコ、
固定床型バイオリアクター)
(シングルユース
バイオリアクター)
スフェクション
(PEI、
リン酸カルシウム)
(TFF)
(クロマトグラフィー)
(TFF、
ろ過滅菌、充填/仕上げ)
当社の製造プラットフォームおよび/またはGMP対応に関する詳細については、VectorBuilderのサービスチームにお問い合わせください。
分析方法
品質管理試験
下の表は、GMP-likeおよびGMPグレードのウイルスベクターの出荷前品質管理検査のためのデフォルトQC試験（✓印）をまとめたものです。オプションのQC試験は、個々のプロジェクトの必要性に応じて実施します。
| 属性 | QC試験 | GMP-Like | GMPグレード | |
|---|---|---|---|---|
| 一般/物理的特性 | 浸透圧 | 凝固点降下法 | オプション | ✓ |
| pH | pHメーター | ✓ | ✓ | |
| 微粒子 | 遮光式粒子計測試験 | オプション | ✓ | |
| 外観 | 目視検査 | オプション | ✓ | |
| 抽出可能容量 | 直接測定 | オプション | ✓ | |
| 物理的力価 | qPCR | ✓ | ✓ | |
| ddPCR | オプション | ✓ | ||
| ELISA | ✓ | ✓ | ||
| 感染性力価 | TCID50 | オプション | オプション | |
| 効力 | mRNA転写 | RT-qPCR | オプション | ✓ |
| RT-ddPCR | オプション | オプション | ||
| タンパク質発現 | フローサイトメトリー(FCM) | オプション | オプション | |
| 同一性（特性） | 全長プラスミド配列 | サンガーシーケンシング | ✓ | ✓ |
| NGS | オプション | オプション | ||
| 第三世代シーケンシング | オプション | オプション | ||
| 純度 | カプシドタンパク質の純度 | SDS-PAGEおよび銀染色 | ✓ | ✓ |
| 空カプシド比率 | 透過型電子顕微鏡 (TEM) | オプション | オプション | |
| 質量光度法 (MP) | ✓ | ✓ | ||
| 分析用超遠心分離 (AUC) | オプション | ✓ | ||
| 荷電検出質量分析 (CDMS) | オプション | オプション | ||
| 凝集 | 動的光散乱 (DLS) | オプション | オプション | |
| サイズ排除クロマトグラフィー (SEC) | オプション | ✓ | ||
| ゲノムインテグリティ | アルカリゲル電気泳動 | ✓ | ✓ | |
| プロセス関連不純物 | 残留プラスミドDNA | qPCR | ✓ | ✓ |
| ddPCR | Optional | Optional | ||
| 残留宿主細胞DNA | qPCR | ✓ | ✓ | |
| 残留E1A配列 | qPCR | ✓ | ✓ | |
| 残留宿主細胞DNA断片サイズ | キャピラリー電気泳動 (CE) | オプション | ✓ | |
| 残留宿主細胞タンパク質 | ELISA | ✓ | ✓ | |
| 残留ベンゾナーゼ | ELISA | ✓ | ✓ | |
| 残留アフィニティーリガンド | HPLC | オプション | オプション | |
| 残留トランスフェクション試薬 | HPLC | オプション | オプション | |
| 残留超遠心分離剤 | HPLC | オプション | ✓ | |
| 残留界面活性剤 | HPLC | オプション | オプション | |
| 製品関連不純物 | 複製能を有するAAV (RCA) | qPCR | オプション | ✓ |
| 安全性 | 無菌性 | 直接接種 | オプション | オプション |
| 膜ろ過無菌試験 | ✓ | ✓ | ||
| エンドトキシン | キネティック発色法 (KCA) | ✓ | ✓ | |
| マイコプラズマ | DNA染色 | ✓ | オプション | |
| qPCR | ✓ | オプション | ||
| 直接培養および指標細胞培養 | オプション | ✓ | ||
| 外来性ウイルス試験/td> | 細胞培養（MRC-5、VERO、HEK293細胞を使用） | オプション | ✓ | |
| 交付書類 | - | - |
1. COA
2. 製造サマリー
3. TSE/BSE文書 (要望に応じて対応可)
|
1. COA
2. TSE/BSE文書
3. CTD文書
4. その他(BMRなど要望に応じて対応可)
|
| 属性 | QCアッセイ | GMP-Like | GMPグレード | |
|---|---|---|---|---|
| 一般/物理的特性 | 浸透圧 | 凝固点降下法 | オプション | ✓ |
| pH | pHメーター | ✓ | ✓ | |
| 微粒子 | 遮光式粒子計測試験 | オプション | ✓ | |
| 外観 | 目視検査 | オプション | ✓ | |
| 抽出可能容量 | 直接測定 | オプション | ✓ | |
| 物理的力価 | RT-qPCR | オプション | ✓ | |
| ELISA | ✓ | ✓ | ||
| 機能的力価 | qPCR | ✓ | ✓ | |
| フローサイトメトリー(FCM) | オプション | ✓ | ||
| 感染性力価 | TCID50 | オプション | オプション | |
| 効力 | mRNA転写 | RT-ddPCR | オプション | オプション |
| タンパク質発現 | フローサイトメトリー (FCM) | オプション | オプション | |
| 同一性（特性） | 全長プラスミド配列 | サンガーシーケンシング | ✓ | ✓ |
| NGS | オプション | オプション | ||
| 第三世代シーケンシング | オプション | オプション | ||
| 純度 | 凝集 | 動的光散乱 (DLS) | オプション | オプション |
| プロセス関連不純物 | 残留プラスミドDNA | qPCR | ✓ | ✓ |
| ddPCR | オプション | オプション | ||
| 残留宿主細胞DNA | qPCR | ✓ | ✓ | |
| 残留E1A配列 | qPCR | ✓ | ✓ | |
| 残留SV40 LTA配列 | qPCR | ✓ | ✓ | |
| 残留宿主細胞DNA断片サイズ | キャピラリー電気泳動 (CE) | オプション | ✓ | |
| 残留宿主細胞タンパク質 | ELISA | ✓ | ✓ | |
| 残留ベンゾナーゼ | ELISA | ✓ | ✓ | |
| 残留アフィニティーリガンド | HPLC | オプション | オプション | |
| 残留トランスフェクション試薬 | HPLC | オプション | オプション | |
| 残留界面活性剤 | HPLC | オプション | オプション | |
| 製品関連不純物 | 複製能を有するレンチウイルス (RCL) | 細胞培養 | オプション | ✓ |
| 安全性 | 無菌性 | 直接接種 | オプション | オプション |
| 膜ろ過無菌試験 | ✓ | ✓ | ||
| エンドトキシン | キネティック発色法 (KCA) | ✓ | ✓ | |
| マイコプラズマ | DNA染色 | ✓ | オプション | |
| qPCR | ✓ | オプション | ||
| 直接培養および指標細胞培養 | オプション | ✓ | ||
| 外来性ウイルス試験 | 細胞培養（MRC-5、VERO、HEK293細胞を使用） | オプション | ✓ | |
| 交付書類 | - | - |
1. COA
2. 製造サマリー
3. TSE/BSE文書 (要望に応じて対応可)
|
1. COA
2. TSE/BSE文書
3. CTD文書
4. その他(BMRなど要望に応じて対応可)
|
上記に記載されていない追加のQCサービスもご要望に応じて提供可能です。詳細については、当社のサービスチームにお問い合わせください。
安定性試験
医薬品の安定性試験は、ICHガイドラインに従って実施されます。光、温度、pHなどがウイルスベクターDNAの品質特性に与える影響を評価するために、強制劣化試験が実施されます。
当社のGMP施設
VectorBuilderは現在、約100,000平方フィートの最新鋭のGMP準拠施設を保有しており、米国、EU、日本、中国、およびPIC/SのGMP規制を満たす高度な設計と最新鋭の設備を備えています。当社の施設はICHガイドラインに準拠しており、治験フェーズ I/II/III用のGMP製造、商業生産に適しています。
- 製造プロセス・分析法開発スイート
- GMP製造スイート
- 充填/仕上げスイート
- QCラボ施設
- GMP保管施設
PD/パイロットラン向けに、合計8,400平方フィートにわたる複数のGMPスイートを有しています。すべてのBSL-2認証エリアは、グレードC環境にグレードAのBSCを設置して構成されています。
当社のGMPスイートは、様々なスケールでプラスミド、ウイルスベクター、および細胞株を製造できるように設計されています。各スイートには独立したエアフローが装備されています。当社のスイートにはグレードB/C環境にグレードAのBSCが含まれ、BSL-2認証を受けています。
当社の自動充填システムは、グレードC環境内のグレードAアイソレーター内に設置されています
当社の独立したQCラボ施設は、幅広いQC試験に対応するため、合計9,500平方フィートにわたる複数のラボスイートで構成されています。
製品の保管とモニタリングのために、6,500平方フィートのICH準拠の保管施設を保有しています。
