IVT mRNA

図2.   マウスにおけるルシフェラーゼ（Luc）mRNAの発現とmRNAによる免疫応答。(A) インジェクション後6時間、24時間、48時間のライブイメージングによりルシフェラーゼ活性を可視化した。(B）2つの炎症性サイトカイン（IL-6とTNF-⍺)をインジェクション後48時間の血清中で定量した。エラーバーは標準誤差を表す。マウスの系統： C57BL/6J；マウス年齢：8週；注射方法：筋肉内注射。(C）ウイルス抗原A、ウイルス抗原B、またはコントロールPBSをコードする30ugのLNPカプセル化mRNAの筋肉内注射14日後のBalb/Cマウス由来の脾臓細胞のIFN-γ ELISpotアッセイ。

図3. in vitroにおけるhSpCas9 mRNAの検証。 A） IVT Cas9 mRNAを、EGFPを標的とする2種類のgRNAとともに293T-EGFP細胞にトランスフェクションした。非処理（NC）細胞およびトランスフェクション細胞におけるEGFP発現を顕微鏡で観察し（B）、フローサイトメトリーを用いて定量した（C、D）。ゲノム上のEGFP遺伝子への編集は、T7E1アッセイとサンガーシークエンスによって確認された(E、F）。

hSpCas9 mRNAをお試しください

図4. VectorBuilderのLNP-mRNAを用いて作製されたヒトCAR-T細胞は、CD19陽性細胞に対して細胞傷害性を示した。(A) ヒトプライマリーT細胞に脂質ナノ粒子（LNP）でカプセル化した抗CD19 CAR mRNAをトランスフェクションした。CAR-T細胞の殺傷能力は、CD19陽性Raji細胞との共培養および放出される乳酸脱水素酵素（LDH）の測定により検証した。(B) 異なる共刺激ドメイン、4-1BB（CD19-BBz, 1949 nt）またはCD28（CD19-28z, 1931 nt）を持つ抗CD19 CARをコードする2種類のIVT mRNAをLNPにカプセル化した。(C) 活性化したヒトT細胞にそれぞれのLNP-mRNAをトランスフェクションし、CD19 CARの発現を確認した。(D) 様々なエフェクター細胞とターゲット細胞（E:T）比でCAR-T細胞とRaji細胞を18時間共培養し、LDHアッセイによりT細胞誘導性細胞傷害活性を測定した。

既製品抗hCD19 CAR IVT mRNAをお試しください  

既製品抗hCD19 CAR IVT saRNAをお試しください 

既製品抗hCD19 CAR IVT circRNAをお試しください 

図 5. 蛍光標識キャップ付きEGFP IVT mRNAの作製と検証 (A) 蛍光キャップなし、Cy3標識キャップ付き、Cy5標識キャップ付きEGFP IVT mRNAサンプルのゲル電気泳動図。(B) 等量のEGFP IVT mRNAをトランスフェクションし、24 時間後のHEK293T細胞におけるEGFP発現の蛍光顕微鏡像。(C,D) 非標識EGFP IVT mRNAまたは蛍光標識EGFP IVT mRNAをトランスフェクションし、 6，24，48時間後のフローサイトメトリー解析によるEGFP平均蛍光強度(C)とEGFP陽性細胞の割合 (D) 。(E) Cy3標識キャップEGFP IVT mRNAによるトランスフェクション後、6，24，48時間におけるCy3平均蛍光強度（棒グラフ）および Cy3陽性細胞の割合（丸印）を示すフローサイトメトリー解析結果。 (F) Cy5標識キャップ EGFP IVT mRNAによるトランスフェクション後、6，24，48時間におけるCy5 平均蛍光強度（棒グラフ）およびCy5陽性細胞の割合（丸印）を示すフローサイトメトリー解析結果。