どの薬剤耐性選択マーカーを使うべき?

ベクタービルダー社は様々な薬剤選択マーカー(ピューロマイシン(Puro)、ネオマイシン(Neo)、ハイグロマイシンB(Hygro)、ブラストサイジン(Bsd))を用意しており、ベクターに組み込むことができます。一般的にピューロマイシンは他の抗生物質よりも高い再現性で素早く非耐性細胞を死滅させることができます。そのため、ほとんどの細胞タイプに対してピューロマイシンの使用を推奨しています。薬剤に対する感受性は細胞タイプによって大きく異なります。ある細胞タイプは薬剤耐性マーカーを持たなくても特定の薬剤に対して十分な耐性を持っている場合がある一方、別の細胞タイプは薬剤耐性マーカーを持っていても薬剤耐性を獲得できない場合があります。それゆえ、実験で使用する細胞タイプにとって最適な薬剤耐性マーカーを事前にテストする必要があります。

一般的に使用されている薬剤の推奨濃度と選択期間

抗生物質 細胞株 推奨濃度 推奨選択培養日数
ピューロマイシン 293T 1-2 ug/ml 3-5 日

ジェネティシン(G418)

HT1080 500-1000 ug/ml 7-11 日
ブラストサイジン 293T 5-15 ug/ml 7-11 日
ハイグロマイシンB 293T 100-200 ug/ml 5-7 日

注:

a. ジェネティシン(Geneticin;G418) は、ネオマイシン耐性遺伝子を発現する細胞を選択するために使用します。

b. 継代細胞ではブラストサイジンの選択培養日数が短縮されることがあります。

各薬剤耐性マーカーの詳細はこちらから