AAVセロタイプテストパネル
アデノ随伴ウイルス (AAV) は遺伝子治療用ベクターとして最も有望なウイルスベクターとして認識されています。その理由はセロタイプ（血清型）の違いによって、異なるキャプシッドタンパク質を組成し、異なる組織指向性、形質導入効率さらに低い免疫原性を示すためです。VectorBuilderのセロタイプテストパネルは、ベクタービルダーの18種類のセロタイプラインナップから、プロジェクトの必要に応じでお好みのセロタイプを最小3ユニットからご購入いただけます。レポーターEGFP発現用プロモーターは、CAGとCMVの2種類からお選びいただけます。研究にお使いになる細胞や組織に適したセロタイプとプロモーターを体系的に比較し特定するために最適なスクリーニング用キットです。
特長
- 当社のAAVセロタイプテストパネルは、世界中で市販されているAAVセロタイプキットの中で、唯一18種類もの充実したコレクションから自由に選択し、素早く手配し、実験に役立てられるキットです。最低3ユニットからご注文が可能です。
- マーカーEGFPの発現は、CAGプロモーターまたはCMVプロモーターの2種類をご用意しています。プロモーター条件を固定し、異なるセロタイプのAAVを用いてEGFPを目的細胞や組織に形質導入を行い、セロタイプごとのパフォーマンスの検証が行います。
AAVセロタイプテストパネルの注文情報 プライスマッチ
| 製品名 | カタログ番号 | タイターと容量 | 価格 (消費税・送料別) | 在庫状況 |
|---|---|---|---|---|
| In vitro grade AAVセロタイプテストパネルl (CMV-EGFP) | PANEL-AAVS01 | 1012 GC/ml, 25 ul |
12,500円 1ユニット当たり |
ストックあり |
| In vitro grade AAVセロタイプテストパネル (CAG-EGFP) | PANEL-AAVS02 | |||
| In vivo grade AAVセロタイプテストパネル (CMV-EGFP) | PANEL-AAVSP01 | 1013 GC/ml, 25 ul |
25,000円 1ユニット当たり |
|
| In vivo grade AAVセロタイプテストパネル(CAG-EGFP) | PANEL-AAVSP02 |
注:
a. 当社の標準AAVセロタイプコレクションは、AAVs 1, 2, 3, 4, 5, 6, 6.2, 7, 8, 9, rh10, DJ, DJ/8, PHP.eB, PHP.S, AAV2-retro, AAV2-QuadYF そして AAV2.7m8です。
b. セロタイプテストパネルで提供しているAAVパッケージングは、ssAAVです。 scAAV(自己相補型AAV)の場合は、 デザインサポートを依頼する から当社にお問い合わせください。
c. 最低3ユニットからのご注文になります。 例：AAV2を3ユニット(合計3ユニット）、AAVDJを10ユニットとAAV9を1ユニットとAAVPhP.Sを1ユニット(合計12ユニット）、全てのセロタイプを各1ユニット(合計18ユニット）など、ご選択はフレキシブルです。ご不明点やパネルのカスタマイズは、 デザインサポートを依頼する から当社にお問い合わせください。
価格は予告なく変更される場合があります。
発送と保存
非超純粋AAVは Tris組成バッファーに、超純粋AAVはPBS組成バッファーに保存されています。お受け取り後、直ちにウイルスは -80°Cで保存してください。1年間の安定した長期保存が可能です。2-3週間の短期保存は、-20°C で、また解凍後のAAVは、4 °Cにて1-2週間安定に保存できます。
技術情報
AAVベクター
AAVセロタイプテストパネルは、ベクタービルダーの既製品AAVウイルスで、CAGまたはCMVプロモーターでEGFPを発現させる汎用的な組み換えAAVウイルスです。ベクタービルダーのAAVトランスファープラスミドベクターは、生きたウイルスの高タイターパッケージング、目的細胞や組織への効率よい形質導入、そして搭載した遺伝子の高レベル発現を目的細胞や組織で実現するように最適化されています。作製されたAAVウイルスベクターは、各キャプシッドのセロタイプに対して至適形質導入効率を保持し、安全性に優れたウイルスです。
図 1. EGFP発現型AAVベクター (A)CMV promoterまたは (B)CAG promoter
AAVセロタイプと組織指向性
多くのAAV系統が自然界では単離されています。 これらのAAVはウイルス表面のキャプシッドタンパク質の抗原性によって異なるセロタイプ（血清型）に分類されています。異なるセロタイプは異なる組織指向性(感染の組織特異性）を付与します。そのため、ウイルスパッケージにさまざまなキャプシドタンパク質を使用することで、さまざまなセロタイプをウイルスに与えることができます。 AAVセルタイプテストパネルは、複数のAAVセロタイプの組織特異性を体系的に比較するように設計されており、実験に最適なセロタイプを選択するのに役立ちます。以下の表は、さまざまなAAVセロタイプによって付与される組織特異性を示しています。
セロタイプ別リスト
組織別リスト
| セロタイプ | 組織指向性 |
|---|---|
| AAV1 | Smooth muscle, skeletal muscle, CNS, brain, lung, retina, inner ear, pancreas, heart, liver |
| AAV2 | Smooth muscle, CNS, brain, liver, pancreas, kidney, retina, inner ear, testes |
| AAV3 | Smooth muscle, liver, lung |
| AAV4 | CNS, retina, lung, kidney, heart |
| AAV5 | Smooth muscle, CNS, brain, lung, retina, heart |
| AAV6 | Smooth muscle, heart, lung, pancreas, adipose, liver |
| AAV6.2 | Lung, liver, inner ear |
| AAV7 | Smooth muscle, retina, CNS, brain, liver |
| AAV8 | Smooth muscle, CNS, brain, retina, inner ear, liver, pancreas, heart, kidney, adipose |
| AAV9 | Smooth muscle, skeletal muscle, lung, liver, heart, pancreas, CNS, retina, inner ear, testes, kidney, adipose |
| AAV-rh10 | Smooth muscle, lung, liver, heart, pancreas, CNS, retina, kidney |
| AAV-DJ | Liver, heart, kidney, spleen |
| AAV-DJ/8 | Liver, brain, spleen, kidney |
| AAV-PHP.eB | CNS |
| AAV-PHP.S | PNS |
| AAV2-retro | Spinal nerves |
| AAV2-QuadYF | Endothelial cell, retina |
| AAV2.7m8 | Retina, inner ear |
| 組織タイプ | 推薦するAAVセロタイプ |
|---|---|
| Smooth muscle | AAV1, AAV2, AAV3, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV-rh10 |
| Skeletal muscle | AAV1, AAV9 |
| CNS | AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV7, AAV8, AAV9, AAV-rh10, AAV-PHP.eB |
| PNS | AAV-PHP.S |
| Brain | AAV1, AAV2, AAV5, AAV7, AAV8, AAV-DJ/8 |
| Retina | AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV7, AAV8, AAV9, AAV-rh10, AAV2-QuadYF, AAV2.7m8 |
| Inner ear | AAV1, AAV2, AAV6.2, AAV8, AAV9, AAV2.7m8 |
| Lung | AAV1, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV6.2, AAV9, AAV-rh10 |
| Liver | AAV1, AAV2, AAV3, AAV6, AAV6.2, AAV7, AAV8, AAV9, AAV-rh10, AAV-DJ, AAV-DJ/8 |
| Pancreas | AAV1, AAV2, AAV6, AAV8, AAV9, AAV-rh10 |
| Heart | AAV1,AAV4, AAV5, AAV6, AAV8, AAV9, AAV-rh10, AAV-DJ |
| Kidney | AAV2, AAV4, AAV8, AAV9, AAV-rh10, AAV-DJ, AAV-DJ/8 |
| Adipose | AAV6, AAV8, AAV9 |
| Testes | AAV2, AAV9 |
| Spleen | AAV-DJ, AAV-DJ/8 |
| Spinal nerves | AAV2-retro |
| Endothelial cells | AAV2-QuadYF |
実験による検証
哺乳動物細胞で当社カスタム製造のウイルスで高い形質導入効率を得られるように、トリプルトランスフェクション用のAAVパッケージング プロトコールを最適化しています。当社独自の技術や試薬を数多く開発してウイルスを作製しています。
図 2. HEK293T細胞に、18種類の異なるAAVセロタイプキャプシドでパッケージングしたCMV>EGFP vector (VB010000-9394npt)を遺伝子導入した。ウイルス感染から48時間後のEGFP蛍光を異なるセロタイプ間で比較観察した。スケールバー: 100 μm.
図 3. HeLa細胞に、18種類の異なるAAVセロタイプキャプシドでパッケージングしたCMV>EGFP vector(VB010000-9394npt)を遺伝子導入した。ウイルス感染から48時間後にフローサイトメトリーを使用して、EGFPの(A) 平均蛍光強度 (MFI) および (B) 陽性細胞を定量化した。 (C) EGFP蛍光を異なるセロタイプ間で比較観察した。スケールバー: 100 μm.
図 4. Huh-7 細胞に、18種類の異なるAAVセロタイプキャプシドでパッケージングしたCMV>EGFP vector (VB010000-9394npt). を遺伝子導入した。ウイルス感染から48時間後にフローサイトメトリーを使用して、EGFPの(A) 平均蛍光強度 (MFI) および (B) 陽性細胞を定量化した。 (C) EGFP蛍光を異なるセロタイプ間で比較観察した。スケールバー: 100 μm.