IRES-EGFP circRNA

VectorBuilderのIRES-EGFP IVT circRNAは、イントロンスプライシングにより形成された共有結合で閉じた環状RNAから強いGFP発現を誘導できます。このcircRNAは分解速度が変化するため、従来のmRNAと比較してGFP発現期間が延長されます。さらに、m6A修飾により翻訳効率をさらに高めつつ、免疫原性を低減させることが可能です。実験コントロールとして持続的な発現を要する場合やin vivo実験に非常に有用です。

製品情報プライスマッチ

IRES-EGFP IVT circRNAから翻訳されるアミノ酸配列はこちら >>

出荷形態と保存方法

IVT circRNA製品は、1 mMのクエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.4）中に保存され、-80°Cで最大12ヶ月間保存することができます。製品はドライアイスで出荷され、凍結融解の繰り返しは避けてください。

リソース

Unmodified
m6A-modified

図1. EGFPをコードするcircRNAまたは従来のmRNAをHEK293T細胞に導入した際の発現期間の比較

Gel electrophoresis analysis of precursor and circular EGFP RNA (circRNA-EGFP) after incubation with varying concentrations of RNase A as indicated above. RNAse A will digest all linear but not circular RNA

図2. 様々なRNase A濃度で処理した後の前駆体RNAと環状EGFP RNA（circRNA-EGFP)の電気泳動像。RNase Aは線状RNAを分解できるが、環状RNAを分解しない。

図3. m6A修飾による環状RNA（circRNA）発現の増強。(A) N6-メチルアデノシン（m6A）を非導入または部分的に導入した場合はEGFP circRNA（ピンク矢印）が効率的に作製できたが、m6Aを完全導入（100％）すると環状化が阻害された。（環状化RNAは線状RNAよりも電気泳動の進行が遅い）(B) 12ウェルプレートで培養中のHEK293T細胞に1ウェルあたりRNA 1 μgをトランスフェクションした結果、m6Aを5%含むcircRNAが最も高いEGFP発現を示した。露光時間：明視野 200 ms、EGFP 100 ms。